IgG SAFLAŞTIRILMASI İÇİN İMAK ADSORBENT OLARAK Ni(II) İMMOBİLİZE MİKROKRİYOJELLER
Tez Türü: Doktora
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Hacettepe Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Kimya A.B.D., Türkiye
Tez Danışmanı: Handan Yavuz Alagöz
Tezin Onay Tarihi: 2023
Tezin Dili: Türkçe
Desteklendiği Program: Diğer
Özet:
Bu çalışmada, immünoglobulin G (IgG) saflaştırılması için immobilize metal afinite kromatografisi (IMAK) yoluyla etkili ve seçici bir adsorbent geliştirmek amacıyla, Poli(hidroksietil metakrilat) Poli(HEMA) bazlı makrogözenekli mikroboyutlu kriyojeller (mikrokriyojeller) sentezlenmiş ve N-metakrilol-(L)-sistein metil ester (MAC) ile fonksiyonelleştirilmiştir. IgG molekülleri için spesifik bağlanma bölgeleri oluşturmak üzere MAC grupları Ni²⁺ iyonları ile koordine edilmiştir. Hazırlanan mikrokriyojeller, yüksek geçirgenlik, hızlı kütle taşınımı ve geliştirilmiş protein adsorpsiyonu sağlayan, iyi derecede birbirine bağlı makrogözenekli yapılara sahip olmuştur. Mikrokriyojellerin yapısal ve morfolojik karakterizasyonu, taramalı elektron mikroskobu (SEM), SEM enerji dağılımlı X-ışını spektroskopisi (EDX) ve Fourier-dönüşümlü kızılötesi spektroskopisi (FT-IR) ile gerçekleştirilmiştir. Adsorpsiyon çalışmaları, %6.05 bağıl standart sapma (RSD) ile 53.05 mg/g yüksek IgG bağlanma kapasitesini ortaya koymuş ve sistemin tekrarlanabilirliğini göstermiştir. Sığır serum albümini (BSA) ve plazma proteinleri kullanılarak yapılan seçicilik deneyleri, mikrokriyojellerin IgG’ye karşı yüksek özgüllüğünü doğrulamış ve bu bulgu sodyum dodesil sülfat-poliakrilamid jel elektroforezi (SDS-PAGE) analizi ile desteklenmiştir. Elde edilen sonuçlar, Ni²⁺ ile koordine edilmiş Poli(HEMA-MAC)-Ni(II) mikrokriyojellerin IgG moleküllerinin seçici ayrılması ve saflaştırılması için umut verici bir platform sunduğunu açıkça göstermektedir. Bu çalışma, biyofarmasötik üretim ve büyük ölçekli antikor saflaştırma süreçlerinde potansiyel uygulamalara sahip, maliyet etkin ve verimli kromatografik malzemelerin geliştirilmesine katkı sağlamaktadır.